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[闲聊] 什么是假病毒？

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奔三的高中生 发表于 2021-10-16 02:13:12 | 只看该作者 打印 上一主题 下一主题
 
什么是假病毒？
假病毒是指一种反转录病毒整合了另外一种病毒的囊膜糖蛋白，从而形成的具有外源性病毒囊膜，而基因组仍保持着反转录病毒本身基因组特性的病毒，又称为假型病毒。
如何产生假病毒？
用带有一种病毒外膜蛋白基因的质粒与带有另一种病毒骨架基因的质粒共转染到包装细胞（如293T细胞）中，外膜蛋白基因在包装细胞表面表达出外膜蛋白，另一种病毒的基因在包装细胞中转录翻译组装成病毒颗粒，病毒颗粒出芽时会被细胞表面表达的外膜蛋白所包装，即形成假病毒。

什么是假病毒？ 第1张图片
（https://www.researchgate.net/figure/Pseudovirus-generation-Cloned-env-in-a-mammalian-expression-vector-lacking-an-HIV-1_fig10_283075399）
目前构建假病毒的体系主要有两种：一种是基于鼠类白血病病毒（MuLV）等反转录病毒载体的假病毒构建体系;另一种是以慢病毒如（HIV-1）为基础发展起来的假病毒构建体系。以慢病毒载体为基础的假病毒对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。

什么是假病毒？ 第2张图片

假病毒具有哪些优势？
与自然源性病毒相比，假病毒感染系统主要具有以下优势∶
①具有单轮感染特性，生物安全性较高。
假病毒核酸分子上编码囊膜蛋白的基因被修饰掉，因此不具备自我复制能力，只能进行单一周期的侵染，不能再组装成病毒颗粒。
②在系统中可引入报告基因，便于检测和分析。
可引入的报告基因主要有分泌型胎盘磷酸酯酶（SEAP）、β一半乳糖苷酶（Lac Z）、β一葡萄糖苷酸酶（GUS）、萤火虫荧光素酶（LUC）和绿色荧光蛋白（GFP）等，便于进行定性和定量分析。
③制备过程相对简单快速，降低了病毒变异，减少了检测时间。
④宿主范围广泛、易被浓缩成高滴度、稳定性及转染效率高。
在研究致病性高，并目不易体外培养的病毒时，制备假病毒是一种行之有效的、安全的、可信的方法。假病毒通常被用于病毒与宿主细胞间相互关系检测、受体鉴定、中和抗体效价评价及基因治疗等方面研究。


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标签：反转录病毒形成的外源性膜蛋白共转染
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龙龙killer 发表于 2021-10-16 02:13:18 | 只看该作者
 
什么是假病毒？
假病毒是指一种反转录病毒整合了另外一种病毒的囊膜糖蛋白，从而形成的具有外源性病毒囊膜，而基因组仍保持着反转录病毒本身基因组特性的病毒，又称为假型病毒。
如何产生假病毒？
用带有一种病毒外膜蛋白基因的质粒与带有另一种病毒骨架基因的质粒共转染到包装细胞（如293T细胞）中，外膜蛋白基因在包装细胞表面表达出外膜蛋白，另一种病毒的基因在包装细胞中转录翻译组装成病毒颗粒，病毒颗粒出芽时会被细胞表面表达的外膜蛋白所包装，即形成假病毒。

第5张图片
（https://www.researchgate.net/figure/Pseudovirus-generation-Cloned-env-in-a-mammalian-expression-vector-lacking-an-HIV-1_fig10_283075399）
目前构建假病毒的体系主要有两种：一种是基于鼠类白血病病毒（MuLV）等反转录病毒载体的假病毒构建体系;另一种是以慢病毒如（HIV-1）为基础发展起来的假病毒构建体系。以慢病毒载体为基础的假病毒对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。

第6张图片

假病毒具有哪些优势？
与自然源性病毒相比，假病毒感染系统主要具有以下优势∶
①具有单轮感染特性，生物安全性较高。
假病毒核酸分子上编码囊膜蛋白的基因被修饰掉，因此不具备自我复制能力，只能进行单一周期的侵染，不能再组装成病毒颗粒。
②在系统中可引入报告基因，便于检测和分析。
可引入的报告基因主要有分泌型胎盘磷酸酯酶（SEAP）、β一半乳糖苷酶（Lac Z）、β一葡萄糖苷酸酶（GUS）、萤火虫荧光素酶（LUC）和绿色荧光蛋白（GFP）等，便于进行定性和定量分析。
③制备过程相对简单快速，降低了病毒变异，减少了检测时间。
④宿主范围广泛、易被浓缩成高滴度、稳定性及转染效率高。
在研究致病性高，并目不易体外培养的病毒时，制备假病毒是一种行之有效的、安全的、可信的方法。假病毒通常被用于病毒与宿主细胞间相互关系检测、受体鉴定、中和抗体效价评价及基因治疗等方面研究。
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